體外哺乳動物細胞染色體畸變試驗常見問題與解答

—熱點問題—

第一題    一張玻片可觀察到200個中期分裂相嗎？如果不夠，該如何處理？

大多數(shù)情況下，一張玻片很難找到200個可用于分析的中期分裂相，建議同一個劑量組多制作一些玻片，本公司一個劑量組通常會制作至少4張玻片，以保證足夠中期分裂相細胞可供分析。

第二題    如何辨別細胞是否處于中期分裂相？

中期分裂相細胞染色體數(shù)目、形態(tài)比較固定，染色體包含兩條染色單體，具體見下圖：

第三題    有絲分裂指數(shù)測定的意義是什么？

中期分裂相指數(shù)是指所觀察的細胞中中期分裂相細胞的占比，是一項反映細胞增殖程度的指標。

第四題    油鏡如何使用？是否要將油鏡鏡頭整個浸入油中？

油鏡的使用需要搭配香柏油，香柏油與玻璃的折光率相近，光線穿過載玻片進入香柏油發(fā)生折射較少，而進入油鏡的光較多，視野較為明亮。油鏡使用時，需要將油鏡鏡頭浸入香柏油中，并與玻片接觸，使用結(jié)束后使用少量二甲苯擦拭干凈鏡頭。

第五題    中期分裂相細胞少是什么原因?qū)е?？如何?yōu)化？

中期分裂相細胞少的原因如下：

（1）秋水仙素的劑量過小，作用時間過短；

（2）重懸時固定液量過大，細胞密度過低。

優(yōu)化策略：

（1）秋水仙素劑量大，則作用時間短；

（2）秋水仙素劑量小，則適當延長作用時間，請選擇適宜的劑量和時間；

（3）根據(jù)細胞的收集量確定重懸體積；

（4）適當增加滴片的數(shù)量。

第六題    染色體聚集可能是由哪些原因?qū)е拢?/span>

染色體聚集的可能原因如下：

（1）秋水仙素用量過多，導(dǎo)致染色體的過度濃縮；

（2）低滲時間不足，導(dǎo)致染色體聚集在一起分散不開；

（3）細胞懸液未充分吹打均勻；

（4）載玻片未進行預(yù)冷，玻片表面張力不夠；

（5）滴片高度不夠。

第七題    染色體分散過度可能是由哪些原因?qū)е拢?/span>

染色體分散過度的根本原因就是細胞膜破裂。主要由以下可能：

（1）低滲時間過長；

（2）離心速度過高；

（3）細胞操作過程不注意，操作過度；

（4）滴片距離過高。

第八題    染色體畸變試驗閱片需要配套什么樣的顯微鏡？如何操作？

染色體畸變試驗使用中期分裂相阻斷劑（如秋水仙素或秋水仙胺）處理細胞，使細胞停止在中期分裂相，此時染色體形態(tài)、數(shù)目都比較固定，使用普通生物顯微鏡即可進行染色體結(jié)構(gòu)畸變觀察。先于低倍鏡下尋找背景清晰、分散良好、染色體收縮適中的中期分裂相細胞，再于油鏡下進行染色體畸變觀察并記錄。

第九題    玻片想要長期保存，需要如何處理？

如果玻片要長期保存，必須要做好封片（可使用中性樹脂膠并加蓋玻片），并置于陰涼干燥處保存。

發(fā)    文    章    得     獎    勵

凡使用本公司產(chǎn)品，在國內(nèi)及國際刊物上發(fā)表論文（論文發(fā)表日起一年內(nèi)），并注明產(chǎn)品屬于匯智和源/IPHASE所有，即可申請獎勵。根據(jù)發(fā)表刊物影響因子不同，給予不同金額獎品：

非SCI論文及IF≤5分，500元禮品；

5分＜IF≤8分 800元；

8分＜IF≤10分 1000元；

IF≥10分 2000元；

注：禮品卡也可兌換同等金額產(chǎn)品購買抵用券；

活動多多，禮品豐厚，快來參與吧！

關(guān)    于    我    們

匯智和源，致力于為創(chuàng)新藥研發(fā)企業(yè)及生命科學(xué)研究機構(gòu)提供高品質(zhì)的生物試劑，IPHASE為公司核心品牌，品牌宗旨“Innovative Reagents For Innovative Research"。